PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-432531

概述

Pik3c3 编码 III 类磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）催化亚基（常称为 PI 3-kinase p100/Vps34），该酶生成磷脂酰肌醇 3-磷酸（PI3P），从而调控内体膜的身份识别与膜运输。在小鼠细胞中，该激酶产生的 PI3P 是自噬起始、内体向溶酶体成熟以及通过与 VPS15、Beclin 1 等调控伙伴形成复合物而介导的囊泡分选的核心因素。Pik3c3 的活性能够整合营养与应激信号，协调溶酶体稳态与细胞质量控制，影响蛋白质稳态、线粒体更新以及免疫信号等过程。与 Pik3c3 功能相关的内溶酶体与自噬通路失调，常在神经退行性疾病、感染生物学以及肿瘤细胞代谢等研究背景下被重点关注。

PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Pik3c3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Pik3c3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Pik3c3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PI 3-kinase p100蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建Pik3c3缺失的细胞模型，用于PI 3-kinase p100信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 PI 3-kinase p100 功能至关重要的 Pik3c3 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 Pik3c3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 PI 3-kinase p100 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Pik3c3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 PI 3-kinase p100 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 PI 3-kinase p100 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Pik3c3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Pik3c3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。