PHF5ACRISPR激活质粒(h): sc-407986-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PHF5A CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- PHF5A CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 PHF5A CRISPR 激活质粒 (h) 和 PHF5A CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 PHF5A 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PHF5ACRISPR激活质粒(h) | sc-407986-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
PHF5ACRISPR激活质粒(h2) | sc-407986-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
PHF5A（PHD 指状蛋白 5A）是 U2 snRNP 的 SF3b 亚复合体中一个保守组分，可支持剪接体的组装并维持 pre‑mRNA 剪接的准确性。通过稳定对分支点与 3′ 剪接位点的识别，PHF5A 参与转录本同工型的选择，从而影响细胞周期进程、DNA 损伤应答以及分化程序。扰动 PHF5A 依赖的剪接会重塑基因表达网络，并与 RNA 加工失调背景下的脆弱性相关，包括剪接体功能承压的肿瘤状态。作为核心剪接因子，PHF5A 常用于研究 RNA 成熟通路，以及由剪接驱动的表型变化机制。
PHF5A CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PHF5A的表达。
PHF5A CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的PHF5A基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于PHF5A转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性PHF5A表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的PHF5A位点，并能够研究内源性位点上依赖于PHF5A的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PHF5A表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PHF5A通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。