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Pellino 2CRISPR激活质粒(h) | sc-402305-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
Pellino 2CRISPR激活质粒(h2) | sc-402305-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 **PELI2** 基因编码 Pellino 2,这是一种 E3 泛素连接酶,帮助将模式识别受体信号与下游的炎症和抗病毒反应相衔接。Pellino 2 参与对 Toll 样受体(TLR)和白细胞介素‑1 受体(IL‑1R)通路中适配蛋白与激酶复合体的泛素依赖性调控,从而塑造 NF‑κB 与 MAPK 信号的激活,并影响细胞因子产生。通过调节蛋白周转与信号强度,PELI2 有助于维持先天免疫稳态,并参与与炎症信号失调相关的细胞应激反应。围绕 Pellino 2 的泛素化调控及其相关先天免疫通路的异常,已在免疫介导疾病机制与宿主—病原体相互作用的研究背景下得到探讨。
Pellino 2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PELI2的表达。
Pellino 2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的PELI2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于PELI2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Pellino 2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的PELI2位点,并能够研究内源性位点上依赖于Pellino 2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PELI2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Pellino 2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。