Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDK3双切口酶质粒(h): sc-404502-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PDK3 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PDK3双切酶质粒（h）和PDK3双切酶质粒（h2）编码针对PDK3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PDK3: sc-365378，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PDK3双切口酶质粒(h) | sc-404502-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PDK3双切口酶质粒(h2) | sc-404502-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PDK3 编码丙酮酸脱氢酶激酶同工型 3（pyruvate dehydrogenase kinase isoform 3），是一种线粒体丝氨酸/苏氨酸（Ser/Thr）激酶，可通过磷酸化并抑制丙酮酸脱氢酶复合体（PDH 复合体），从而限制丙酮酸向乙酰辅酶 A（acetyl‑CoA）的转化，并使碳流从三羧酸循环（TCA 循环）转向其他途径。通过这一关键控制点，PDK3 将营养供给与缺氧信号与葡萄糖氧化、乳酸生成以及更广泛的线粒体生物能量代谢相整合。PDK3 活性失调与病理性的代谢重编程及氧化还原平衡改变有关，并有报道提示其与癌细胞代谢以及神经肌肉和周围神经疾病相关。作为氧化代谢的调控因子，PDK3 常在线粒体应激反应、对糖酵解的依赖以及代谢适应等研究背景中被重点关注。
PDK3 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PDK3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PDK3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PDK3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PDK3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。