Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PDI Antibody (C-5): sc-376369. Western blot analysis of PDI expression in JAR (A), HeLa (B) and HT-1080 (C) whole cell lysates.
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PDI双切口酶质粒(h): sc-400676-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PDI 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PDI双切酶质粒（h）和PDI双切酶质粒（h2）编码针对P4HB的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PDI: sc-74551，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PDI双切口酶质粒(h) | sc-400676-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PDI双切口酶质粒(h2) | sc-400676-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 P4HB 编码蛋白二硫键异构酶（PDI）。PDI 是一种多功能的氧化还原酶兼分子伴侣，在内质网中蛋白质折叠过程中催化二硫键的形成、还原与异构化。PDI 通过未折叠蛋白反应（UPR）和内质网相关降解（ERAD）维持内质网蛋白质稳态，并通过巯基–二硫键交换反应参与氧化还原信号传导。P4HB/PDI 活性失调与细胞应激反应改变、分泌通路能力变化以及蛋白质稳态失衡有关，这些现象在多种疾病相关情境中均有观察到，包括肿瘤生物学与神经退行性变模型。作为氧化性蛋白折叠的核心组分，PDI 常被用于研究调控蛋白成熟、分泌及氧化还原稳态的相关通路。
PDI 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 P4HB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对P4HB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏P4HB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了P4HB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。