非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PDI 抗体 (C-2): sc-74551. Hep G2 (A), Jurkat (B), H4 (C), c4 (D), BYDP (E) 和 WR19L (F) 全细胞裂解液中 PDI 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PDI CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-422099
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PDI CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在PDI基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PDI: sc-74551，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PDI CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-422099 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
P4hb 编码蛋白二硫键异构酶（PDI），这是一种在内质网中高丰度表达的氧化还原酶，能够催化二硫键的形成、还原与异构化，从而支持分泌蛋白和膜蛋白的折叠与成熟。PDI 参与内质网蛋白稳态（proteostasis）网络，与伴侣蛋白和其他氧化还原酶协同，调控氧化性蛋白折叠与质量控制，并参与内质网应激信号传导及未折叠蛋白反应（UPR）通路。通过其硫醇-二硫键交换活性以及与错误折叠底物的相互作用，PDI 影响氧化还原稳态、蛋白转运以及在蛋白毒性应激下的细胞生存决策。P4hb/PDI 活性的失调与以慢性内质网应激和氧化还原平衡改变为特征的病理状态相关，因此在神经退行性变、代谢功能障碍和肿瘤生物学等模型的机制研究中是一个重要靶点。
PDI CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中P4hb基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对P4hb基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏P4hb开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PDI蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建P4hb缺失的细胞模型，用于PDI信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 PDI 功能至关重要的 P4hb 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 P4hb 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 PDI CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 PDI CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 P4hb 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 PDI HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 PDI HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由P4hb同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定P4hb靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。