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PDGF-CCRISPR激活质粒(h) | sc-401977-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
PDGFC 编码血小板衍生生长因子 C(PDGF‑C),这是一种分泌型生长因子,经过蛋白水解激活后,主要通过含 PDGFRα 的受体复合物传递信号,从而调控间充质细胞的增殖、迁移以及细胞外基质重塑。PDGF‑C 通过激活包括 PI3K–AKT 和 RAS–MAPK 在内的受体酪氨酸激酶通路,参与血管生成与基质相关程序,并影响成纤维细胞活化及血管周细胞行为。在人类组织中,PDGFC 表达失调与纤维化重塑和异常血管模式形成相关,并常在肿瘤–基质相互作用与侵袭性生长的研究中被重点关注。这些作用使 PDGFC 成为解析发育、创伤修复及由微环境驱动的疾病模型中旁分泌信号机制的一个重要节点。
PDGF-C CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PDGFC的表达。
PDGF-C CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的PDGFC基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于PDGFC转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性PDGF-C表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的PDGFC位点,并能够研究内源性位点上依赖于PDGF-C的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PDGFC表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PDGF-C通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。