非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PDGF-A 抗体 (E-10): sc-9974. HeLa (A) 和 NTERA-2 cl. D1 (B) 全细胞裂解液中 PDGF-A 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PDGF-A双切口酶质粒(h): sc-400711-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PDGF-A 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PDGF-A双切酶质粒（h）和PDGF-A双切酶质粒（h2）编码针对PDGFA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PDGF-A: sc-9974，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PDGF-A双切口酶质粒(h) | sc-400711-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PDGF-A双切口酶质粒(h2) | sc-400711-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 PDGFA 基因编码血小板衍生生长因子A（PDGF-A），这是一种分泌型促有丝分裂因子，主要通过 PDGF 受体α以及 α/β 异二聚体传递信号，从而调控间充质细胞的增殖、迁移与存活。PDGF-A 的活性会启动 MAPK/ERK、PI3K–AKT 和 PLCγ 等信号级联反应，协同促进细胞外基质重塑、血管生成支持以及基质—上皮之间的通讯。PDGFA/PDGFR 信号失调与纤维化重塑及肿瘤微环境生物学密切相关，在这些过程中，改变的旁分泌生长因子信号可重塑血管与基质相关程序。因此，PDGFA 常被用于研究发育模式建立、与创伤愈合相关的过程，以及由生长因子驱动的细胞状态转换。
PDGF-A 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PDGFA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PDGFA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PDGFA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PDGFA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。