非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Pdcd-1双切口酶质粒(m): sc-422150-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Pdcd-1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Pdcd-1双切酶质粒（m）和Pdcd-1双切酶质粒（m2）编码针对Pdcd1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Pdcd-1: sc-56200，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Pdcd-1双切口酶质粒(m) | sc-422150-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Pdcd-1双切口酶质粒(m2) | sc-422150-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
程序性细胞死亡蛋白 1（Programmed cell death 1，Pdcd1；PD-1，Pdcd-1）编码一种抑制性免疫受体，主要表达于活化的 T 细胞、B 细胞及部分髓系细胞亚群，可抑制免疫激活并促进外周免疫耐受。PD-1 与 PD-L1（Cd274）或 PD-L2（Pdcd1lg2）结合后，会招募 SHP 蛋白磷酸酶，削弱近端 TCR/CD28 信号传导，降低 PI3K–AKT 与 RAS–MAPK 通路活性，从而限制细胞因子产生、增殖以及代谢重编程。该免疫检查点轴在慢性抗原暴露下对 T 细胞衰竭及分化状态至关重要，并影响生发中心反应以及与自身免疫相关的免疫失调。在小鼠模型中，Pdcd1 功能被广泛用于研究肿瘤免疫学、慢性感染和炎症性疾病机制，其中 PD-1 信号的改变会影响免疫稳态。
Pdcd-1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Pdcd1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pdcd1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Pdcd1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Pdcd1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。