Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PDC-E2 Antibody (A-9): sc-365276. Western blot analysis of PDC-E2 expression in HeLa (A), MCF7 (B), SJRH30 (C), Sol8 (D) and L6 (E) whole cell lysates and rat postnatal heart tissue extract (F).
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PDC-E2双切口酶质粒(h): sc-402520-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PDC-E2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PDC-E2双切酶质粒（h）和PDC-E2双切酶质粒（h2）编码针对DLAT的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PDC-E2: sc-271534，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PDC-E2双切口酶质粒(h) | sc-402520-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PDC-E2双切口酶质粒(h2) | sc-402520-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 DLAT 基因编码二氢硫辛酰胺 S-乙酰转移酶（PDC‑E2），它是线粒体丙酮酸脱氢酶复合体的 E2 催化核心。该复合体将丙酮酸来源的碳转化为乙酰辅酶 A，从而为三羧酸循环（TCA）和氧化磷酸化提供底物。PDC‑E2 通过其硫辛酰化结构域介导酰基转移，并协调糖酵解与线粒体呼吸之间的代谢通量，进而影响 NADH 生成与氧化还原平衡。DLAT/PDC‑E2 功能受扰与能量代谢受损及线粒体功能障碍相关；此外，PDC‑E2 还是原发性胆汁性胆管炎中研究充分的自身抗原，将其生物学功能与免疫相关病理联系起来。
PDC-E2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DLAT 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DLAT内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DLAT的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DLAT基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。