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PCTAIRE-3慢病毒激活颗粒(m) | sc-422147-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
Cdk18 编码丝氨酸/苏氨酸激酶 PCTAIRE-3(CDK18),它是细胞周期依赖性激酶(CDK)家族成员之一,参与调控与细胞周期相关的磷酸化程序以及细胞骨架动力学。在小鼠细胞中,PCTAIRE-3 与蛋白质周转和应激反应信号调控有关,并被报道与调节 DNA 损伤应答及细胞在蛋白毒性条件下的存活相关通路存在联系。CDK 家族信号的改变与增殖表型和基因组维护密切相关,因此 Cdk18 可作为解析激酶驱动调控网络的一个有用节点。研究内源性 PCTAIRE-3 活性可支持在细胞周期控制、神经元或生殖细胞相关的激酶生物学,以及疾病相关模型中的通路绘制等方面开展机制研究,但不意味着具有临床获益。
PCTAIRE-3 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Cdk18 表达。
PCTAIRE-3 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Cdk18转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PCTAIRE-3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Cdk18 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。