Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PCNA Antibody (PC10): sc-56. Western blot analysis of PCNA expression in HeLa (A), K-562 (B) and HCT-116 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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PCNA双切口酶质粒(h): sc-400037-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PCNA 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PCNA双切酶质粒（h）和PCNA双切酶质粒（h2）编码针对PCNA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PCNA: sc-56，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PCNA双切口酶质粒(h) | sc-400037-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PCNA双切口酶质粒(h2) | sc-400037-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PCNA（增殖细胞核抗原）是一种高度保守的 DNA“滑动夹”，可环抱双链 DNA，从而提高复制型聚合酶的过程性，并协调复制与修复复合体的组装。它作为带有 PIP-box 基序蛋白的中心平台发挥作用，并通过包括泛素化与 SUMO 化在内的翻译后修饰整合信号，以引导跨损伤合成（TLS）、模板切换以及修复通路的选择。PCNA 对 S 期进程、冈崎片段成熟以及多种 DNA 损伤应答过程至关重要，将复制压力与检查点调控和染色质恢复联系起来。PCNA 依赖的复制与修复程序一旦失调，往往与基因组不稳定性表型广泛相关，这些表型在癌症、神经退行性疾病及其他 DNA 维护障碍中均有研究报道。
PCNA 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PCNA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PCNA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PCNA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PCNA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。