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PCDHGA11CRISPR激活质粒(h) | sc-407326-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
PCDHGA11 编码原钙黏蛋白 γ-A11(protocadherin gamma-A11),这是一种属于簇状原钙黏蛋白家族的钙依赖性细胞黏附蛋白,有助于细胞—细胞识别与组织结构的构建。原钙黏蛋白支持依赖接触的信号传导、膜结构组织以及细胞骨架动力学,从而影响神经元连接性,并更广泛地参与上皮细胞或免疫细胞之间的相互作用。原钙黏蛋白表达模式的改变常与黏附失调及谱系程序异常相关,这些现象可见于神经发育表型以及肿瘤相关过程。作为黏附与细胞表面受体网络的一部分,PCDHGA11 常被用于研究其对细胞身份、突触或连接结构组织,以及细胞间接触下游转录状态的影响。
PCDHGA11 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PCDHGA11的表达。
PCDHGA11 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的PCDHGA11基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于PCDHGA11转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性PCDHGA11表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的PCDHGA11位点,并能够研究内源性位点上依赖于PCDHGA11的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PCDHGA11表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PCDHGA11通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。