Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PC-PLD2 Antibody (B-3): sc-515744. Western blot analysis of PC-PLD2 expression in untreated (A) and chemically-treated (B) K-562 whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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PC-PLD2双切口酶质粒(h): sc-402056-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PC-PLD2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PC-PLD2双切酶质粒（h）和PC-PLD2双切酶质粒（h2）编码针对PLD2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PC-PLD2: sc-515744，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PC-PLD2双切口酶质粒(h) | sc-402056-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PC-PLD2双切口酶质粒(h2) | sc-402056-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 PLD2 基因编码磷脂酶 D2（PC-PLD2），这是一种膜相关酶，可水解磷脂酰胆碱生成磷脂酸。磷脂酸作为一种脂质第二信使，能够塑造膜曲率并影响信号微区的形成。PLD2 的活性与受体驱动的通路相互衔接，包括 EGFR、GPCR 以及小 GTP 酶信号，从而影响囊泡运输、内吞作用、肌动蛋白细胞骨架重塑和细胞迁移。通过磷脂酸依赖性地调控 mTOR 和 MAPK 信号，PLD2 参与代谢与生长相关的细胞反应，并与炎症信号输出有关。多种情境下均有 PLD2 信号失调的报道，例如肿瘤细胞侵袭性增强、免疫细胞趋化以及神经炎症过程，因此它是研究脂质介导信号机制的一个有用节点。
PC-PLD2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PLD2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PLD2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PLD2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PLD2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。