非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PB1 抗体 (D-8): sc-390095. F9 全细胞裂解液中 PB1 表达的 Western 印迹分析. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PB1双切口酶质粒(m): sc-426270-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PB1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PB1双切酶质粒（m）和PB1双切酶质粒（m2）编码针对Pbrm1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PB1: sc-390095，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PB1双切口酶质粒(m) | sc-426270-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PB1双切口酶质粒(m2) | sc-426270-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Pbrm1 编码 PB1（也称 PBRM1/BAF180），它是 PBAF 型 SWI/SNF 染色质重塑复合体的标志性亚基。PB1 通过多个溴结构域识别乙酰化组蛋白，并帮助定位核小体以调控转录。PB1 通过协调染色质可及性与转录因子结合，影响增强子—启动子通讯、DNA 损伤应答以及谱系特异性的分化程序。Pbrm1 的缺失或功能破坏会扰乱对细胞周期与应激反应网络的表观遗传调控，因此常在抑癌生物学、基因组稳定性和炎症信号传导等研究背景下被深入探讨。在小鼠模型中，Pbrm1 也常用于解析染色质重塑因子如何塑造免疫微环境、代谢适应以及发育表型。
PB1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Pbrm1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pbrm1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Pbrm1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Pbrm1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。