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PB1双切口酶质粒(h) | sc-403988-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PB1双切口酶质粒(h2) | sc-403988-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PBRM1 编码多溴结构域蛋白 1(polybromo-1,PB1),它是 PBAF(SWI/SNF)ATP 依赖性染色质重塑复合体的标志性亚基,负责调控核小体定位与染色质可及性。PB1 通过其溴结构域参与解读组蛋白乙酰化信号,并协调与细胞周期控制、DNA 损伤应答及谱系特异性分化相关的转录程序。PBRM1 的活性与表观遗传调控、增强子功能以及维持基因组稳定性的通路相互衔接,从而塑造细胞身份。PBRM1 的破坏或调控异常常在研究染色质重塑缺陷时被重点关注,尤其与肿瘤抑制因子生物学及转录失调相关。
PB1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PBRM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PBRM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PBRM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PBRM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。