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paxillin双切口酶质粒(m) | sc-422546-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
paxillin双切口酶质粒(m2) | sc-422546-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Pxn 基因编码黏着斑蛋白(paxillin),这是一种多结构域的黏着斑适配蛋白,在细胞黏附、铺展与迁移过程中协调整合素依赖的信号传导以及肌动蛋白细胞骨架重塑。Paxillin 作为激酶和 GTP 酶调控因子的支架,整合来自 FAK/SRC 及下游 RHO 家族通路的信号,从而调控黏着斑周转与机械信号转导。通过这些功能,它影响细胞对细胞外基质的感知、片状伪足动态以及细胞极性。Paxillin 信号及黏着斑重塑的失调常与疾病相关模型中的运动性改变和侵袭性表型相关,因此 Pxn 是研究与黏附相关信号网络的一个有用节点。
paxillin 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Pxn 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pxn内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Pxn的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Pxn基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。