Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
patched/PTCH1 Antibody (H-10): sc-518102. Western blot analysis of patched expression in untreated HeLa (A), chemically-treated HeLa (B), untreated K-562 (C) and chemically-treated K-562 (D) whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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patched/PTCH1双切口酶质粒(h): sc-400457-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- patched/PTCH1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- patched/PTCH1双切酶质粒（h）和patched/PTCH1双切酶质粒（h2）编码针对PTCH1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：patched/PTCH1: sc-518044，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
patched/PTCH1双切口酶质粒(h) | sc-400457-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
patched/PTCH1双切口酶质粒(h2) | sc-400457-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PTCH1 编码人类 patched 受体，这是一种 12 次跨膜蛋白，是 Hedgehog（刺猬）信号通路中主要的配体结合与抑制性组成部分。在缺乏 Hedgehog 配体时，PTCH1 会抑制 SMO 的活性，从而限制由 GLI 介导的转录程序；这些程序调控胚胎模式形成、干/祖细胞行为以及组织稳态。PTCH1 的功能与初级纤毛中的运输与信号转导密切相关，可在初级纤毛处整合发育信号与细胞周期及分化状态。PTCH1 的遗传或调控层面的扰动会导致 Hedgehog 通路输出失衡，因此在发育障碍以及 Hedgehog 驱动的肿瘤生物学研究中被广泛关注。
patched/PTCH1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PTCH1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PTCH1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PTCH1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PTCH1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。