
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PARP1CRISPR激活质粒(h) | sc-400046-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
PARP1 编码多聚(ADP-核糖)聚合酶 1(PARP1),这是一种核内 DNA 损伤传感器,可催化自身及其他与染色质相关蛋白的 PAR 化(PARylation),以协同协调 DNA 修复。PARP1 在碱基切除修复和单链断裂修复中发挥关键作用,同时还通过与组蛋白和修复支架蛋白的相互作用,影响染色质重塑、复制叉稳定性以及转录调控。通过与 ATM/ATR 信号通路及更广泛的基因组维护网络的串扰,PARP1 有助于在氧化应激和复制应激条件下维持基因组完整性。PARP1 活性失调以及 DNA 修复能力改变,常与多种癌症背景中观察到的基因组不稳定性表型以及与神经退行性疾病相关的应激反应有关,从而支持其作为 DNA 修复研究中的机制性靶点。
PARP1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PARP1的表达。
PARP1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的PARP1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于PARP1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性PARP1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的PARP1位点,并能够研究内源性位点上依赖于PARP1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PARP1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PARP1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。