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PARP-2双切口酶质粒(m) | sc-419019-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Parp2 编码 PARP-2,这是一种 DNA 损伤传感器兼多聚(ADP-核糖)聚合酶,可通过催化对染色质相关蛋白的 ADP-核糖基化来促进基因组维护。PARP-2 参与碱基切除修复和单链断裂修复,协调修复因子的募集、染色质重塑以及复制完整性的恢复。通过与 PARP-1、XRCC1 相关的修复复合体以及应激信号通路的串扰,PARP-2 有助于调控细胞周期检查点以及细胞对基因毒性应激的反应。PARP-2 活性失调或 PARylation 动态改变与小鼠模型中基因组不稳定性、炎症信号以及肿瘤生物学等研究密切相关。
PARP-2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Parp2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Parp2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Parp2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Parp2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。