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PAR4双切口酶质粒(h) | sc-401142-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PAR4双切口酶质粒(h2) | sc-401142-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PAWR 编码促凋亡蛋白 PAR4(前列腺凋亡反应蛋白 4),这是一种与肿瘤抑制相关的因子,可调控内源性与外源性凋亡通路,并拮抗促进细胞存活的信号。PAR4 通过与非典型 PKC 同工酶、NF-κB 调控节点以及凋亡执行机制相互作用,影响转录与应激反应程序,从而与在基因毒性和炎症应激条件下对细胞命运决策的控制相关联。多种人类癌症中均有 PAWR/PAR4 表达异常的报道,并且与凋亡敏感性、细胞分化以及转移行为的改变有关。除肿瘤学背景外,PAR4 还被认为与神经退行性变及其他疾病相关,在这些疾病中,失衡的细胞死亡与应激信号传导会促成病理过程。
PAR4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PAWR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PAWR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PAWR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PAWR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。