非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PAR4 抗体 (3G9H7): sc-130078. 非转染: sc-110760 (A) 和小鼠 PAR4 转染: sc-179292 (B) 293 全细胞裂解液中 PAR4 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PAR4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-431134
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PAR4 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在PAR4基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PAR4: sc-1666，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PAR4 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-431134 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
小鼠 Pawr 基因编码 PAR4（前列腺凋亡反应蛋白 4），这是一种富含脯氨酸并含有亮氨酸拉链结构的蛋白，能够调控决定细胞命运的转录程序。PAR4 促进凋亡信号传导，并可拮抗促存活通路，包括通过相互作用影响 NF-κB 活性以及蛋白激酶信号级联（如 PKC 依赖性反应）。由于其可充当信号复合体的支架并调控基因表达，PAR4 还与细胞应激反应、分化以及细胞骨架调控相关。PAWR/PAR4 活性失调与癌症生物学中凋亡阈值改变有关，也与炎症及神经退行性疾病相关过程相关，在这些过程中，应激诱导的细胞死亡与存活信号会发生紊乱。
PAR4 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Pawr基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Pawr基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Pawr开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PAR4蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Pawr缺失的细胞模型，用于PAR4信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 PAR4 功能至关重要的 Pawr 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Pawr 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 PAR4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 PAR4 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Pawr 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 PAR4 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 PAR4 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Pawr同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Pawr靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。