Pannexin-1慢病毒激活颗粒(m): sc-424967-LAC
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- Pannexin-1 慢病毒激活颗粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- Pannexin-1慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 Pannexin-1 慢病毒激活质粒 (m) 和 Pannexin-1 慢病毒激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 靶向 Panx1 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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Pannexin-1慢病毒激活颗粒(m) | sc-424967-LAC | 200 µl | $455.00 |
Panx1 编码 pannexin-1（潘宁蛋白1），这是一种广泛表达于质膜的通道蛋白，可实现对 ATP 及其他小分子的受调控释放，从而支持旁分泌信号传导。Pannexin-1 的活性与嘌呤能（P2X/P2Y）受体通路相互整合，共同塑造钙离子通量、与炎性小体相关的信号传递，以及细胞在应激、机械刺激和细胞死亡过程中产生的协调性反应。在小鼠体系中，Panx1 被认为参与调控免疫细胞募集与细胞因子网络，并通过细胞外核苷酸信号调节神经元与胶质细胞之间的通讯。PANX1 通道功能失调及 ATP 释放动力学改变，常作为机制研究靶点，被用于神经炎症、神经病理性疼痛、缺血性损伤应答以及肿瘤—免疫相互作用等研究情境中。
Pannexin-1 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Panx1 表达。
Pannexin-1 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Panx1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Pannexin-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Panx1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。