P2Y9慢病毒激活颗粒(m): sc-429620-LAC

Lpar4 编码溶血磷脂酸受体4（lysophosphatidic acid receptor 4，常称 P2Y9），这是一种 GPCR，可感知细胞外溶血磷脂酸（LPA），并通过异源三聚体 G 蛋白进行信号转导，从而调控 cAMP、细胞内钙离子以及 MAPK/ERK 通路活性。在小鼠细胞中，LPAR4/P2Y9 影响细胞骨架重塑、细胞黏附与迁移行为，并整合进更广泛的脂质介质信号网络，参与组织发育以及免疫—基质细胞之间的通讯。LPA–LPAR 信号的失调与炎症性重塑、代谢紊乱以及肿瘤相关微环境信号有关，因此 Lpar4 可作为研究 GPCR 驱动的细胞表型机制的一个有用节点。该靶点也常用于阐明脂质信号如何与转录程序相连接，从而调控增殖、屏障功能与分化等过程。

P2Y9 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Lpar4 表达。

P2Y9 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Lpar4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性P2Y9表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Lpar4 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。