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P2X7双切口酶质粒(h) | sc-400780-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
P2X7双切口酶质粒(h2) | sc-400780-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 P2RX7 基因编码 P2X7 嘌呤能受体,这是一种由 ATP 门控的阳离子通道,可将细胞外危险信号与离子通量、膜通透化以及下游炎症反应相耦联。P2X7 的激活会促进 Ca²⁺/Na⁺ 内流和 K⁺ 外流,从而支持 NLRP3 炎性小体的激活、IL-1β 的成熟以及细胞焦亡;同时也会影响 ROS 生成、自噬和代谢适应。通过这些过程,P2X7 将嘌呤能信号与髓系和淋巴系免疫细胞中的激活、细胞因子释放以及细胞死亡通路联系起来。P2RX7 活性及其信号传导的失调与慢性炎症、神经炎症过程以及肿瘤—免疫微环境的调控有关,因此它是研究先天免疫与应激信号机制的一个有价值靶点。
P2X7 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 P2RX7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对P2RX7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏P2RX7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了P2RX7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。