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OX2双切口酶质粒(m) | sc-421696-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
OX2双切口酶质粒(m2) | sc-421696-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Cd200 基因编码免疫球蛋白超家族的膜糖蛋白 OX2(CD200),它是髓系细胞上表达的 CD200R 的关键抑制性配体。CD200R 被激活后,可通过降低促炎信号并调控细胞因子产生来抑制巨噬细胞和小胶质细胞的激活,从而在组织界面维持免疫稳态。该通路影响抗原呈递细胞功能、白细胞浸润以及炎症消退,常在神经炎症、肿瘤免疫逃逸和类自身免疫病理等研究背景中被重点关注。Cd200/OX2 的表达动态也常用于探究中枢神经系统及外周器官中类似免疫检查点的调控机制。
OX2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Cd200 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Cd200内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Cd200的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Cd200基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。