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OTUD2慢病毒激活颗粒(m) | sc-432624-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠 Yod1 编码去泛素化酶 OTUD2。OTUD2 属于 OTU 家族蛋白酶,可水解泛素链,从而调控蛋白稳定性与信号传递强度。OTUD2 参与依赖泛素的蛋白质稳态(proteostasis)、炎症信号以及应激反应通路的调控,影响 NF-κB 及相关先天免疫回路中关键调节因子的周转。通过对泛素连接类型的“编辑”,OTUD2 还能塑造 DNA 损伤应答与细胞命运决策,这与免疫失调及肿瘤相关信号网络的研究密切相关。在炎症性疾病与肿瘤生物学模型中,人们常常检测去泛素化能力的变化,以理解泛素信号如何重塑转录程序与细胞稳态。
OTUD2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Yod1 表达。
OTUD2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Yod1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性OTUD2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Yod1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。