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osteocalcin双切口酶质粒(h) | sc-400299-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
osteocalcin双切口酶质粒(h2) | sc-400299-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BGLAP 编码骨钙素(osteocalcin),这是一种维生素 K 依赖的 γ-羧化细胞外基质蛋白,由成骨细胞分泌,并在骨矿化过程中被整合进羟基磷灰石。骨钙素参与成骨细胞分化程序以及骨重塑过程,这些过程与 RUNX2 驱动的转录、胶原基质沉积以及钙/磷稳态共同协调。BGLAP 表达变化或骨钙素成熟异常常被用作成骨状态的读出指标,并与骨质疏松、骨软化症以及肿瘤相关骨溶解等疾病中的骨转换失衡有关。作为一种基质相关标志物,骨钙素有助于在骨生物学模型中开展骨骼发育机制、矿化动力学以及微环境信号传导等研究。
osteocalcin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BGLAP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BGLAP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BGLAP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BGLAP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。