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OSCP双切口酶质粒(h) | sc-404116-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
OSCP双切口酶质粒(h2) | sc-404116-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ATP5O 编码寡霉素敏感性赋予蛋白(OSCP),它是线粒体 ATP 合酶(复合体 V)的外周柄亚基,可稳定 F1Fo 全酶复合体,并将质子驱动力耦联到 ATP 生成。OSCP 有助于维持高效的氧化磷酸化,从而支持细胞生物能量供给、线粒体膜电位以及代谢稳态。ATP5O/OSCP 的扰动可改变电子传递链功能、升高活性氧水平,并触发代谢的代偿性重编程。线粒体 ATP 合酶活性及复合体 V 组装的失调已被认为与神经代谢功能障碍以及癌细胞代谢相关,因此 ATP5O 是研究线粒体应激信号通路的一个有用靶点。
OSCP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ATP5O 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATP5O内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ATP5O的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ATP5O基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。