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OSC CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421475 | 20 µg | CNY2986.00 |
Lss 编码氧化鲨烯环化酶(oxidosqualene cyclase,OSC),这是一种与内质网相关的关键酶,负责将 2,3‑氧化鲨烯环化生成羊毛甾醇(lanosterol),从而使代谢通量进入甲羟戊酸(mevalonate)途径的甾醇分支。通过调控甾醇生物合成,OSC 会影响膜胆固醇组成、脂筏(lipid raft)组织以及下游类固醇生成能力。甾醇代谢的扰动通常与脂质稳态失衡及细胞应激程序异常激活密切相关,因此 Lss 是研究生理与疾病相关情境下代谢重塑的一个有用关键节点。在小鼠模型中,干扰 Lss/OSC 提供了一种可操作的手段,用于解析甾醇通路限制如何影响细胞生长、分化,以及对膜脂组成敏感的信号网络。
OSC CRISPR/Cas9 KO质粒(m)是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Lss基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对Lss基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏Lss开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使OSC蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Lss缺失的细胞模型,用于OSC信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
CRISPRs +/- HDR
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。