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Oma1双切口酶质粒(h) | sc-402953-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Oma1双切口酶质粒(h2) | sc-402953-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 OMA1 基因编码应激激活的线粒体内膜金属蛋白酶 Oma1,是线粒体质量控制的关键调控因子。Oma1 会在膜去极化和蛋白毒性应激发生时迅速被激活,切割 OPA1,使线粒体动力学偏向分裂,并协调线粒体自噬、生物能量重塑以及整合性应激信号传导。通过这一 OMA1–OPA1 轴,该蛋白影响嵴膜结构、呼吸链效率以及细胞对凋亡的易感性。OMAI 依赖的蛋白稳态与动力学调控一旦失衡,已被认为与多种疾病中出现的线粒体功能障碍相关,包括神经退行性变、心脏代谢应激及其他与线粒体稳态受损有关的疾病。
Oma1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 OMA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对OMA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏OMA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了OMA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。