非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Oct-3/4 抗体 (A-9): sc-365509. Western 印迹分析 NTERA-2 cl. D1 全细胞裂解液中 Oct-3/4 的表达.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Oct3/4双切口酶质粒(h): sc-410951-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Oct3/4 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Oct3/4双切酶质粒（h）和Oct3/4双切酶质粒（h2）编码针对POU5F1B的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Oct3/4: sc-365509，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Oct3/4双切口酶质粒(h) | sc-410951-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Oct3/4双切口酶质粒(h2) | sc-410951-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
POU5F1B 编码一种与人类 Oct3/4 相关的 POU 结构域转录因子，参与调控与多能性相关的转录程序及染色质状态。Oct3/4 家族的活性与核心“干性”网络及调控自我更新、谱系承诺与重编程的转录回路相互衔接，并对细胞周期控制与表观遗传重塑产生下游影响。已有研究报道 POU5F1B 在多种肿瘤背景中存在异常表达或失调，并被用于探讨其与致癌性转录程序、细胞可塑性以及应激适应性表型之间的关系。因此，该基因对于在人体细胞模型中解析干细胞样状态的形成机制、分化障碍以及由转录因子驱动的疾病生物学具有重要意义。
Oct3/4 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 POU5F1B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对POU5F1B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏POU5F1B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了POU5F1B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。