Date published: 2026-7-22

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OATP-HCRISPR激活质粒(h): sc-404706-ACT

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • OATP-H CRISPER激活质粒(h)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,目的在于特定上调基因表达
  • OATP-H CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒:一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),和杀稻瘟素抗性基因;一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白,和潮霉素抗性基因;一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA,和嘌呤霉素抗性基因。
  • 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因提供转录因子的招募
  • 由 OATP-H CRISPR 激活质粒 (h) 和 OATP-H CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 SLCO4C1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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    OATP-HCRISPR激活质粒(h)

    sc-404706-ACT
    20 µg
    CNY2986.00

    人类 SLCO4C1 基因编码 OATP-H,它是一种属于溶质载体(SLC)超家族的有机阴离子转运多肽,可介导多种内源性代谢物以及类似外源性化合物的底物在细胞膜两侧进行不依赖钠离子的摄取。通过调控两亲性有机阴离子的细胞内流入与分布,OATP-H 参与由转运体驱动的代谢稳态维持,并影响组织对循环中小分子的暴露水平。SLCO4C1 的表达模式及其转运活性与解毒、细胞应激反应以及在屏障与排泄相关情境下的药代动力学处理等通路相互交织。SLCO4C1 调控异常已被用于研究其与肾脏及心代谢表型的关系,并作为影响组织对化学与炎症应激因子特异性易感性的调节因素。

    OATP-H CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SLCO4C1的表达。

    OATP-H CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SLCO4C1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。

    在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SLCO4C1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性OATP-H表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SLCO4C1位点,并能够研究内源性位点上依赖于OATP-H的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SLCO4C1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟OATP-H通路恢复的宝贵工具。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。