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OAS3双切口酶质粒(m) | sc-434225-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Oas3 基因编码 2′-5′-寡腺苷酸合成酶 3(OAS3)。OAS3 是一种由干扰素诱导的胞质病毒双链 RNA 传感器,可催化生成 2-5A,从而激活 RNase L 并促进病毒及宿主细胞 RNA 的降解。OAS3–RNase L 轴与 I 型干扰素信号、先天免疫限制以及应激相关的翻译调控相互整合,共同塑造抗病毒反应和炎症输出。OAS 家族活性的调控异常与干扰素程序失衡及免疫介导的病理改变有关,因此 OAS3 可作为在小鼠模型中解析宿主—病原体相互作用与先天免疫信号动态的一个有用切入点。
OAS3 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Oas3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Oas3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Oas3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Oas3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。