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Nur77双切口酶质粒(m) | sc-420884-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nur77双切口酶质粒(m2) | sc-420884-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Nr4a1 基因编码孤儿核受体 Nur77(NR4A1)。Nur77 是一种即时早期转录因子,能够整合来自 T 细胞受体激活、MAPK 级联反应以及与 NF-κB 相关的炎症程序的信号。Nur77 调控的基因网络参与胸腺细胞的负选择、外周 T 细胞无反应(anergy)、巨噬细胞极化以及代谢适应,并在不同情境下对细胞凋亡和线粒体通路产生不同影响。在神经系统中,Nur77 会被神经元活动和应激激素迅速诱导,从而将钙依赖性信号传导与转录反应联系起来。NR4A1 信号的失调已在自身免疫与慢性炎症、动脉粥样硬化、肿瘤细胞生存程序,以及神经炎症和神经退行性过程等模型中被认为与发病相关。
Nur77 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Nr4a1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nr4a1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Nr4a1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Nr4a1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。