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Nur77双切口酶质粒(h) | sc-418320-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nur77双切口酶质粒(h2) | sc-418320-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NR4A1(Nur77)是一种孤儿核受体兼即时早期转录因子,能够整合促有丝分裂信号、炎症信号与应激刺激,从而迅速重编程基因表达。它在核受体信号通路中发挥作用,调控细胞凋亡、增殖、代谢以及免疫细胞分化;并在不同情境下对 T 细胞激活/耐受、巨噬细胞极化和血管生物学产生差异化影响。Nur77 的活性与 MAPK、NF-κB 以及 PI3K/AKT 相关的转录网络相互交叉,共同塑造细胞因子表达程序与细胞应激反应。NR4A1 表达或信号传导的失调与炎症性疾病、动脉粥样硬化以及多种与肿瘤相关的表型有关,因此可作为研究转录调控机制与细胞命运决定的一个重要节点。
Nur77 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NR4A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NR4A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NR4A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NR4A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。