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NTR1双切口酶质粒(h) | sc-402552-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NTR1双切口酶质粒(h2) | sc-402552-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NTSR1 编码神经降压素受体 1(neurotensin receptor 1,NTR1),它属于 A 类 GPCR,可结合神经肽神经降压素(neurotensin),通过 Gαq/PLCβ 驱动的 Ca²⁺ 动员与 PKC 激活来调控细胞内信号传导,并可进一步耦联 MAPK/ERK 通路及由 β-arrestin 介导的转运过程。NTR1 通过受体去敏化、内吞以及与其他 GPCR 通路的串话,影响神经递质传递、平滑肌收缩和分泌过程。在多种与疾病相关的背景中,NTSR1 的表达与信号改变与增殖和炎症程序失调有关,因此是研究 GPCR 信号动态机制的一个有用节点。作为一种膜受体,NTR1 具有配体诱导的快速内吞特性,也被广泛用于探究受体药理学、区室化信号以及下游转录反应。
NTR1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NTSR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NTSR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NTSR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NTSR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。