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NTCP双切口酶质粒(h) | sc-400840-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NTCP双切口酶质粒(h2) | sc-400840-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SLC10A1 编码钠/牛磺胆酸协同转运多肽(NTCP),这是一种位于肝细胞基底外侧膜的转运体,介导门静脉血中结合型胆汁酸及其他有机阴离子的钠依赖性摄取。NTCP 的活性是肠肝循环中胆汁酸循环的关键环节,并会影响细胞内由胆汁酸激活的信号网络,包括由 FXR 调控的转录程序,这些程序将转运过程与代谢稳态相耦联。SLC10A1/NTCP 功能的改变可扰乱胆汁酸的处理与肝脏生理,从机制上与胆汁淤积表型以及更广泛的脂质和葡萄糖代谢失调相关联。NTCP 同时也是病原体进入肝细胞所需的宿主因子,因此与嗜肝性感染的生物学研究及受体介导摄取过程的研究密切相关。
NTCP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLC10A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC10A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLC10A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLC10A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。