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NR5A2双切口酶质粒(h) | sc-402656-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NR5A2双切口酶质粒(h2) | sc-402656-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NR5A2(核受体亚家族5 A组成员2;LRH-1)是一种孤儿核受体转录因子,可结合激素反应元件,调控控制胆固醇与胆汁酸稳态、类固醇生成以及脂质代谢的基因程序。在上皮细胞环境中,NR5A2还通过将核受体信号的线索与代谢及发育相关的转录网络整合,维持细胞的增殖与分化状态。其活性与调控胰腺和肝脏功能的通路相交叉,而NR5A2表达改变或其调控变异已与多种疾病相关表型有关,包括炎症以及与癌症相关的转录重编程。作为谱系与代谢相关的调控因子,NR5A2常在胃肠道、肝脏与胰腺生物学模型以及转录调控回路分析中被研究。
NR5A2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NR5A2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NR5A2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NR5A2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NR5A2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。