
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NQO1双切口酶质粒(m) | sc-421913-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Nqo1 基因编码 NAD(P)H:醌氧化还原酶 1(NQO1),这是一种位于细胞质的黄素蛋白,催化醌类的两电子还原,从而限制半醌的形成以及活性氧(ROS)的产生。NQO1 是典型的可由 NRF2/KEAP1 诱导的解毒酶,在细胞氧化还原稳态、外源性化合物代谢以及防止亲电体诱导的大分子损伤方面发挥作用。通过这些活动,它会影响氧化应激反应、蛋白质稳态和代谢适应,因此与小鼠模型中炎症、毒物易感性及应激相关表型的研究密切相关。在氧化还原失衡和化学应激改变信号传导与组织损伤通路的情况下,NQO1 活性的变化常被用作研究重点。
NQO1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Nqo1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nqo1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Nqo1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Nqo1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。