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NPC1L1双切口酶质粒(h) | sc-401741-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NPC1L1双切口酶质粒(h2) | sc-401741-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NPC1L1(Niemann-Pick C1-like 1)是一种多跨膜蛋白,介导细胞对胆固醇及其他甾醇的摄取,将肠腔内脂质的可用性与细胞内转运和代谢调控相耦联。在人体组织中,NPC1L1 支持甾醇吸收,并通过与内吞运输通路和脂质处理网络的协同作用,参与胆固醇水平的稳态控制。其活性在功能上与调控甾醇转运、膜脂组成以及脂蛋白代谢的通路相关。NPC1L1 相关过程的失调与高胆固醇血症、动脉粥样硬化风险生物学以及代谢性疾病机制的研究密切相关。
NPC1L1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NPC1L1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NPC1L1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NPC1L1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NPC1L1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。