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Nox4双切口酶质粒(h) | sc-400298-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nox4双切口酶质粒(h2) | sc-400298-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NOX4 编码 Nox4,它是 NADPH 氧化酶家族的催化亚基,可持续性地产生活性氧(ROS),主要为过氧化氢,从而支持细胞的氧化还原信号传导。Nox4 活性会影响调控细胞分化、细胞外基质重塑以及对缺氧和代谢应激的适应性反应等通路,并对 MAPK、TGF-β/SMAD 以及 NF-κB 相关信号产生下游影响。在人体组织中,NOX4 依赖的 ROS 产生失调与氧化应激表型有关,而这些表型被认为参与了纤维化重塑、血管功能障碍以及肿瘤相关信号网络。与受刺激后才激活的氧化酶相比,Nox4 作为一种相对持续的 ROS 来源,被广泛用于研究其在塑造分区化的氧化还原稳态和转录程序中的作用。
Nox4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NOX4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NOX4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NOX4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NOX4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。