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NOS2/iNOS慢病毒激活颗粒(m) | sc-421928-LAC | 200 µl | CNY3422.00 | |||
NOS2/iNOS慢病毒激活颗粒(m2) | sc-421928-LAC-2 | 200 µl | CNY3422.00 |
Nos2 编码诱导型一氧化氮合酶(NOS2/iNOS),该酶在炎症反应和先天免疫反应过程中将 L-精氨酸转化生成一氧化氮(NO)。iNOS 来源的 NO 可调控氧化还原信号、抗微生物防御以及细胞因子网络,并在巨噬细胞及其他被激活的细胞类型中,与 NF-κB、JAK/STAT 和 MAPK 调控的转录程序发生交叉。Nos2 活性变化常被用作炎症、感染与氧化应激模型中的机制性读出指标;在这些情境下,NO 及活性氮物种会影响细胞代谢、线粒体功能和组织重塑。iNOS 信号失衡已在与自身免疫、神经炎症、心血管功能障碍以及肿瘤相关免疫调控有关的实验体系中被提示参与其中。
NOS2/iNOS 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Nos2 表达。
NOS2/iNOS 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Nos2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性NOS2/iNOS表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Nos2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。