非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
泛 NOS 抗体 (NOS-3F7-B11 B5): sc-58399. AMJ2-C8 (A), NIH/3T3 (B) 和 3T3-L1 (C) 全细胞裂解液中泛 NOS 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
NOS2/iNOS双切口酶质粒(m): sc-421928-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- NOS2/iNOS 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- NOS2/iNOS双切酶质粒（m）和NOS2/iNOS双切酶质粒（m2）编码针对Nos2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：NOS2/iNOS: sc-7271，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NOS2/iNOS双切口酶质粒(m) | sc-421928-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NOS2/iNOS双切口酶质粒(m2) | sc-421928-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Nos2 编码诱导型一氧化氮合酶（NOS2/iNOS），该酶在炎症反应和先天免疫应答过程中以 L-精氨酸为底物生成一氧化氮。NOS2 的转录可在 NF-κB、JAK/STAT 以及干扰素信号等通路下游被诱导，从而调控巨噬细胞活化、抗微生物防御以及依赖氧化还原状态的细胞信号调节。持续的 iNOS 活性可导致硝化应激和蛋白质 S-亚硝基化，进而影响线粒体功能、DNA 损伤应答与细胞凋亡。Nos2 调控异常已在感染、自身免疫、神经炎症、心血管功能障碍以及肿瘤相关炎症等模型中被提示参与其中，因此它是研究免疫介导组织损伤机制的重要关键节点。
NOS2/iNOS 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Nos2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nos2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Nos2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Nos2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。