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NOS2/iNOS双切口酶质粒(h) | sc-400066-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NOS2/iNOS双切口酶质粒(h2) | sc-400066-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 NOS2 基因编码诱导型一氧化氮合酶(iNOS)。iNOS 是一种不依赖 Ca2+ 的酶,在炎症刺激下以 L-精氨酸为底物产生高水平输出的一氧化氮(NO)。iNOS 来源的 NO 通过影响氧化还原稳态、S-亚硝基化以及活性氮物种(RNS)的形成,调控先天免疫信号、抗微生物防御以及氧化/硝化应激。NOS2 的表达受细胞因子与模式识别受体驱动的通路调控,包括 NF-κB、JAK/STAT 和 MAPK 级联反应。NOS2 活性失调与慢性炎症和组织损伤相关,并常在肿瘤微环境生物学、神经炎症以及心脏代谢应激反应等研究背景中被关注。
NOS2/iNOS 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NOS2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NOS2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NOS2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NOS2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。