NMNAT-3慢病毒激活颗粒(h): sc-403839-LAC

人类 NMNAT3 基因编码烟酰胺单核苷酸腺苷酸转移酶-3（NMNAT-3），这是一种线粒体酶，催化 NMN 与 ATP 转化生成 NAD+，从而支持细胞器的氧化还原平衡以及依赖 NAD+ 的代谢过程。通过维持线粒体内的 NAD 库，NMNAT-3 会影响氧化磷酸化、活性氧（ROS）处理，以及与细胞应激反应相关的线粒体质量控制过程。NMNAT3 的活性在功能上与更广泛的 NAD 生物合成与补救（salvage）通路相连接，并通过 NAD+ 的可用性与 sirtuin 信号以及 PARP 介导的 DNA 损伤应答发生交叉。线粒体 NAD 稳态失衡与神经退行性变、代谢功能障碍及线粒体疾病机制等研究密切相关，在这些研究中，生物能量学改变与抗应激能力是关键表型。

NMNAT-3 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 NMNAT3 表达。

NMNAT-3 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在NMNAT3转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性NMNAT-3表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 NMNAT3 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。