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Nix双切口酶质粒(h) | sc-401982-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nix双切口酶质粒(h2) | sc-401982-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
BNIP3L 编码 Nix,这是一种定位于线粒体外膜的 BH3-only 蛋白,能够将缺氧与细胞应激信号与程序性线粒体周转过程整合起来。Nix 通过其 LC3 相互作用区域促进线粒体选择性自噬,并与不依赖 PINK1/Parkin 的线粒体自噬程序协同作用,从而在细胞分化与应激适应过程中支持线粒体质量控制。通过调控线粒体膜电位、ROS 稳态以及与 BCL2 家族的相互作用,Nix 影响内源性凋亡与代谢重塑。BNIP3L/Nix 活性失调与线粒体自噬异常及细胞命运决定改变相关,见于神经退行性变、心脏-代谢应激以及肿瘤生物学等情境,因此它是研究线粒体监视通路的一个有价值节点。
Nix 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 BNIP3L 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BNIP3L内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏BNIP3L的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了BNIP3L基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。