非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Nir2 抗体 (8): sc-136140. LADMAC 全细胞裂解液 (A) 和大鼠小脑组织提取物 (B) 中 Nir2 表达的 Western 印迹分析. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Nir2双切口酶质粒(m): sc-422251-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Nir2 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Nir2双切酶质粒（m）和Nir2双切酶质粒（m2）编码针对Pitpnm1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Nir2: sc-136140，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Nir2双切口酶质粒(m) | sc-422251-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nir2双切口酶质粒(m2) | sc-422251-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Pitpnm1 编码 Nir2，这是一种磷脂酰肌醇转运蛋白，通过在膜之间交换脂质并维持质膜上的磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2）库，帮助保持磷脂酰肌醇类脂质（phosphoinositides）的稳态。在小鼠细胞中，Nir2 在内质网–质膜接触位点将受体驱动的磷脂酶 C（PLC）信号与脂质补给连接起来，从而影响钙依赖性信号、膜运输以及细胞骨架动力学。通过调控磷脂酰肌醇类脂质的周转，Nir2 参与细胞迁移、神经突起生长和囊泡运输等对脂质信号通量敏感的过程。磷脂酰肌醇代谢与膜接触位点功能失调在神经生物学、代谢以及增殖信号研究中具有广泛相关性，并为面向疾病的研究模型提供机制切入点。
Nir2 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Pitpnm1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pitpnm1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Pitpnm1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Pitpnm1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。