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NIPBL双切口酶质粒(m) | sc-427895-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NIPBL双切口酶质粒(m2) | sc-427895-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Nipbl 编码 NIPBL,这是一种 cohesin(黏连蛋白复合体)装载因子,在细胞周期中协调姐妹染色单体黏连以及高阶染色质组织。在小鼠细胞中,NIPBL 支持远距离增强子–启动子通讯,并参与调控转录程序,从而支配胚胎发育、谱系决定和 DNA 损伤应答。Nipbl 的破坏会扰乱依赖 cohesin 的基因组结构,并可能影响复制应激信号传导、染色体分离以及基因表达网络。由于 NIPBL 功能异常与发育相关基因的失调和基因组稳定性缺陷有关,因此它是研究 cohesin 蛋白病(cohesinopathies)及染色质相关疾病机制的有用靶点,可用于体内与体外模型研究。
NIPBL 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Nipbl 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nipbl内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Nipbl的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Nipbl基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。