Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Nidogen Antibody (C-7): sc-133175. Near-infrared western blot analysis of Nidogen expression in mouse placenta (A) and rat heart (B) tissue extracts. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 790: sc-516181.
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Nidogen双切口酶质粒(m): sc-421895-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Nidogen 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Nidogen双切酶质粒（m）和Nidogen双切酶质粒（m2）编码针对Nid1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Nidogen: sc-133175，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Nidogen双切口酶质粒(m) | sc-421895-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Nidogen双切口酶质粒(m2) | sc-421895-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Nid1 编码巢蛋白（nidogen/entactin），这是一种硫酸化的基底膜糖蛋白，可连接层粘连蛋白（laminin）与 IV 型胶原网络，从而稳定细胞外基质的结构。巢蛋白通过组织基底膜蛋白复合体，并影响与整合素相关的信号传导及组织形态发生，来支持细胞—基质黏附、迁移与力学信号转导。Nid1 依赖的基质完整性与血管和上皮屏障功能、神经肌肉接头的组织以及器官发育等研究密切相关；在这些过程中，基底膜缺陷会改变分化与组织稳态。含巢蛋白的基质发生失衡时，常在纤维化、肿瘤微环境重塑以及炎症性损伤模型中被研究，被视为决定组织微环境是“许可”还是“限制”的关键因素。
Nidogen 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Nid1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nid1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Nid1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Nid1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。